نوقشت في كلية التربية للبنات قسم علوم الحياة
يوم الخميس الموافق 2024-05-30
وعلى رحاب قاعة القادسية في عمادة الكلية
اطروحة دكتوراه للطالبة شروق حميد مجيد
والموسومة
التقييم العلاجي لعقار Doxorubicin على بعض المعايير التشريحية والنسجية والكيموحيوية لأعضاء البنكرياس، الرئة والدم في ذكور الجرذان البيض البالغة وغير البالغة.
يعرف مرض السرطان Cancer بأنه ورم يتمثل بكتلة نسيجية شاذة لا يتناسب نموها مع نمو الانسجة الاعتيادية، وتتميز بتجاوزها لحدود النمو الطبيعي للخلايا ولا يتوقف نموها بانقطاع العوامل المسببة والمحفزة للنمو اذ يتصف بطاقة غير محدودة لنمو الخلايا المستمر والتي أما ان تمتد محليا وتغزو وتدمر النسيج الطبيعي المجاور وأما ان تنتقل عبر الاوعية الدموية واللمفاوية الى اماكن أخرى من الجسم، وتؤسس بؤرا جديدة والتي بدورها تدمر الاعضاء الجديدة التي تغزوها.
ويعد السرطان احد الاسباب الرئيسية للوفيات في البلدان المتقدمة والنامية، اذ من المتوقع ان يزداد معدل الاصابة بالسرطان وعبئه في جميع انحاء العالم. وقد برزت العلاجات الكيميائية كخيارات علاجية للأورام السرطانية والسيطرة عليها من خلال التأثير على العمليات الخلوية والجزيئية اللازمة لنمو الورم والغزو والانبثاث (الانتشار)، وعلى الرغم من أن هذه العلاجات تحقق النشاط المضاد للورم إلا أنها تسبب العديد من الآثار الجانبية مثل تسمم الأعضاء وغيرها.
من بين هذه العلاجات الكيميائية هو الدوكسوروبسين Doxorubicin (DOX) وهو من العقاقير الكيميائية الفعالة المستخدمة وعلى نطاق واسع. اذ ينتمي الى مجموعة المضادات الحيوية المضادة للأورام ويستخدم بشكل فعال جدا في ادارة مختلف الأورام السرطانية الدموية والصلبة لدى المرضى البالغين والأطفال ويستعمل ايضا في علاج الانسجة الرخوة والرابطة وساركوما العظام وسرطان الدم الليمفاوي الحاد والنخاعي وكذلك سرطانات الثدي، المبيض، المثانة والغدة الدرقية. تتضمن آلية نشاط العقار تغيرات في الحامض النووي الرايبوزي (DNA) وإنتاج الجذور الحرة. المهمة جدا للتسمم الخلوي بوساطة العقار(Wang et al., 2015)، وقد أشارت الكثير من البحوث إلى دوره في إحداث الإجهاد التأكسدي وإنتاج أصناف الأوكسجين الفعالةReactive oxygen species (ROS) الناتجة عن تفاعلات الأكسدة والاختزال لأيض العقار ، وظهور العديد من الآثار الجانبية الشديدة والتي تشمل السمية المباشرة والمزمنة المتأخرة، ووفقا لتصنيف منظمة الصحة العالمية يمكن ملاحظة تأثيراته المباشرة على الجلد، الشعر، نخاع العظام، الدم، الجهاز الهضمي والكلى، كما يمكن أن تتأثر جميع أعضاء الجسم الأساسية مثل القلب، الرئتين والدماغ ، اضافة للكبد والاعضاء التناسلية ( ، وكذلك تأثيره على الخلايا السليمة خاصة الخلايا المتجددة السريعة الانقسام مثل خلايا الدم البيضاء وكريات الدم الحمر
الاهداف من الدراسة
بالنظر لارتفاع معدلات الإصابة بمرض السرطان ولمعرفة الأعراض الجانبية التي يسببها العلاج الكيميائي الذي يستخدم للحد من خطورة المرض لمرضى السرطان بما فيها عقار الدوكسوروبيسين Doxorubicin، وللوقوف على التأثيرات التشريحية والنسجية والكيموحيوية والهرمونية المرافقة لهذا العلاج على بعض الاعضاء، ونظرا لقلة البحوث التي تتناول التأثيرات المرضية على البنكرياس والرئة، لذا أرتأينا في هذه الدراسة تسليط الضوء على الاثار الجانبية المحتملة للعقار على ذكور الجرذان البيض البالغة وغير لبالغة من أجل الوصول الى الاهداف المدرجة أدناه:
1- معرفة مدى تأثير عقار الدوكسوروبيسين المستخدم كمضاد للسرطان على التركيب التشريحي للبنكرياس والرئة، في ذكور الجرذان البيض البالغة وغير البالغة.
2- معرفة مدى تأثير عقار الدوكسوروبيسين المستخدم كمضاد للسرطان على التركيب النسجي للبنكرياس والرئة، في ذكور الجرذان البيض البالغة وغير البالغة.
3- معرفة تأثير علاج الدوكسوروبيسين المستخدم كمضاد للسرطان على بعض المعايير الكيموحيوية في مصل دم ذكور الجرذان البيض البالغة وغير البالغة (هرمون الانسولين، هرمون الكلوكاكون وتركيز (TNF-α، بالاضافة الى حساب عدد خلايا الدم (تعداد خلايا الدم البيض والنسب المئوية لجميع انواع خلاياها، تعداد كريات الدم الحمراء، تركيز الهيموكلوبين، اختبار عدد الصفائح الدموية).
4- دراسة مقارنة للفئات العمرية الاكثر تعرضا للتأثيرات الجانبية لاستخدام عقار الدكسوروبيسين كمضاد للسرطان.
في ضوء النتائج التي تم التوصل إليها تستنتج الباحثة الآتي:
أجريت الدراسة في البيت الحيواني التابع لكلية الطب البيطري - جامعة تكريت وللمدة من 1/3/2022 الى 1/7/2022، شملت الدراسة (120) من ذكور الجرذان البيض المختبرية Albino Rat بأعمار تراوحت ما بين (24-1) شهر ثم وزعت الحيوانات الى (12) مجموعة وبواقع (6) مجاميع للحيوانات غير البالغة جنسيا و (6) مجاميع للحيوانات البالغة جنسيا، وبشكل عشوائي مع الاخذ بنظر الاعتبار مراعاة تقارب أوزان الحيوانات في كل مجموعة قبل البدء بالتجربة، وقد ضمت كل مجموعة (10) حيوانات بحسب خطة الدراسة اذ قسمت بصورة متساوية من حيث عددها وعدد الجرع العلاجية لعقار الدوكسوروبيسين التي عوملت بها حيوانات المجاميع والفترات المقرره بين جرعة واخرى بالاضافة الى مجموعة السيطرة لكلاهما والتي أعطيت ماء الشرب والعليقة الجاهزة يوميا طول فترة التجربة مع معاملتها بجرع من المحلول الملحي الفسلجي NaCl بتركيز (0.9%) بالتزامن مع الجرع العلاجية لعقار الدوكسوروبيسين والذي كان بهيئة مسحوق مجفف بالتبريد، اعطيت الجرع عن طريق الحقن تحت الصفاق (الغشاء البريتوني) في الجهة السفلية للمنطقة البطنية وبتركيز (10mg/Kg) مرة واحدة كل خمسة عشر يوما مع مراعاة تغيير الوزن للحيوانات في كل مجموعة.
أظهرت النتائج التشريحية التأثير الكبير لعقار الـ DOX على التركيب التشريحي العام لمجاميع الحيوانات اذ أظهرت النتائج انخفاض وزن جسم مجاميع الحيوانات التي عوملت بالعقار ولكلا المجموعتين على حد سواء مع استمرار اعطاء جرعات العقار وتساقط الشعر لمجاميع الحيوانات المختلفة والتي كانت في ذروتها بعد المعاملة بثلاثة جرع من العقار، كما أظهرت تكوين السوائل الجسمية داخل التجويف الصدري وحدوث ما يسمى بالانصباب الرئوي نتيجة تأثير العقار المباشر عليها وبدءا من المعاملة بجرعة واحدة من العقار 1 DDox لمجاميع الحيوانات غير البالغة جنسيا وبعد المعاملة بجرعتين من العقار 2 DDox في مجاميع الحيوانات البالغة جنسيا. أظهرت النتائج جحوظ العينين من بعد المعاملة بثلاثة جرع من العقار 3 DDox وبشكل كبير مع تغيير في لون قزحية العينين لحيوانات المجاميع من لونهما الاحمر الغامق الى اللون الوردي بعد المعاملة بأربعة جرع من العقار 4 DDox ثم بداية الابيضاض وتحول لونهما الى اللون الابيض الضبابي.
التغيرات التشريحية والنسجية للاعضاء المدروسة فقد أظهرت النتائج التشريحية للرئة تغيير لونها من الوردي الى الاحمر الغامق وظهور لون الرئة باكثر من لون في بعض المجاميع اذ لوحظ بان تأثير العقار على تغيير لون رئة مجاميع الحيوانات غير البالغة جنسيا بدأ في 1 DDox و 2 DDox في حين تأخر ذلك التغيير الى ما بعد 3 DDox في المجاميع البالغة جنسيا، اضافة الى ظهور حويصلات وتليفات على سطح الرئة والتي اعطت الملمس السميك والخشن للرئة وكذلك ضمور في عدد فصوص الرئة اليمنى والبالغ عددها في مجاميع السيطرة اربعة فصوص ولكلا الفئتين العمرية اذ أظهرت رئة مجاميع بعض الحيوانات الغير بالغة جنسيا 4 DDox كجزء واحد غير مفصص في حين لوحظت الرئة كفصين في مجاميع الحيوانات البالغة جنسيا مع ضمور في شكل الرئة اليسرى للفئتين.
النتائج التشريحية للبنكرياس لمجاميع الحيوانات المعاملة بعقار الـ DOX أظهرت تغييرات تشريحية مظهرية للبنكرياس نتيجة للتأثير السلبي للعقار ومنها التغيير السلبي في حجمها وطولها وكذلك تغيير شكلها بالكامل بخاصة مع استمرار زيادة جرعات المعاملة بالعقار الذي ادى الى فقدان فصوص البنكرياس حيويتها الخلوية، وبالتالي تداخل الفصوص مع بعضها البعض الامر الذي اعطاها شكلا يختلف عن شكلها الذي عرفت به بكونها شريطية الشكل وذات فصوص ناعمة الملمس اذ ظهرت بشكل كتلة شحمية متماسكة مع صغر حجمها وقصر طولها نتيجة للتداخل الذي حدث بين الفصوص واختفاء ملامحها الحقيقية.
النتائج النسجية للرئة والبنكرياس اظهرت تغييرات نسجية كبيرة جدا نتيجة تأثيره المباشر على النسج ففي الرئة أظهرت النتائج حدوث تنكس وانسلاخ الظهارية التنفسية لبطانة القصيبة الهوائية مع تثخن وتليف جدرانها، وزيادة سمك واحتقـان فـي الأوعيـة الدمـويـة والارتشـاح الخـلـوي اللمفـي مع زيادة سمك جدران الاسناخ الرئوية وتكون سوائل الوذمة بين الاسناخ مع خثار دموي وارتشاح لخلايا الدم البيض وحصول تمزق في جدران الاسناخ والاكياس السنخية، مع تليف وتجمع حاد منتشر للخلايا الإلتهابية وتحلل كريات الدم الحمراء مع نزف موضعي وانتشار الخلايا الالتهابية اضافة الى تليف واسع في نسيج الرئة وحزم الالياف الغراوية والارومات الليفية في النسيج الخلالي مع وجود اعداد كبيرة من خلايا الدم البيض والخلايا البلعمية اذ لوحظ تليف واسع لحزم الالياف الغراوية في النسيج الخلالي الذي ارتشح باعداد كبيرة من خلايا الدم البيض بشكل بؤري مع وجود تنخر في بعض مناطق النسيج الخلالي.
بالنسبة للنتائج النسجية للبنكرياس لمجاميع الحيوانات المعاملة بعقار الـ DOX ولكلا الفئتين أظهرت النتائج بأن التغيير حدث منذ المعاملة بجرعة واحدة وجرعتين اذ أظهرت تضخم لخلاياها الافرازية ضمن عنبات البنكرياس ووجود انوية باهتة فاقدة للصبغة، كذلك وجود احتقان دموي للأوعية الدموية بين الفصيصات في متن البنكرياس، وجزر لانكرهانز عانت من تحطم العديد من الخلايا بما في ذلك الخلايا الصماوية في الجزر وفقدان انويتها مع وجود الياف غراوية ضمن الجزء الصماوي والجزء الخارجي الفارز للانزيمات المؤلف من عنبات الغدة فيه تضخم للخلايا الظهارية وفقدان مادة الصبغين للأنوية مع انكماش بعض الخلايا وتفتتها وابتعادها عن الغشاء القاعدي المحيط بالخلايا مع حدوث التليف في النسج.
أظهرت النتائج الكيموحيوية انخفاضا معنويا بمستوى تركيز الانسولين وتركيز عامل نخر الورم الفا (TNF-α)، في حين أرتفع مستوى تركيز هرمون الكلوكاكون في مصل الدم لمجاميع الحيوانات البالغة والغير بالغة جنسيا المعاملة بعقار الـ DOX بالمقارنة مع المجاميع الغير معاملة عند مستوى احتمالية (P<0.05).
اظهرت نتائج الفحوصات الدموية لدم مجاميع الحيوانات المعاملة بعقار الـ DOX ولكلا الفئتين انخفاضا معنويا في تعداد خلايا الدم البيض والنسب المئوية لعدد الخلايا اللمفية والخلايا الوحيدة والخلايا الحمضة، في حين أظهرت ارتفاعا في النسب المئوية لعدد الخلايا العدلة والخلايا القعدة مع زيادة عدد جرعات العقار عند مستوى احتمالية (P<0.05).
اظهرت نتائج الفحوصات الدموية لدم مجاميع الحيوانات المعاملة بعقار الـ DOX ولكلا الفئتين انخفاضا معنويا في تعداد كريات الدم الحمراء وتركيز الهيموكلوبين، في حين أظهرت ارتفاعا في عدد الصفائح الدموية مع زيادة عدد جرعات العقار عند مستوى احتمالية (P<0.05).
تألفت لجنة المناقشة من السادة الافاضل:
ا.د. محمد احمد عبدالله ... رئيسا
ا.د. بثينة عبدالحميد عبدالله.... عضوا
ا.م.د. عمار غانم محمد.... عضوا
ا.م.د. اكتفاء عبدالحميد محمد.... عضوا
ا.م.د. اسراء هاشم علي.... عضوا
ا.د. اياد حميد ابراهيم.... عضوا ومشرفا
وقد أوصت اللجنة بمنح الدرجة المطلوبة للطالبة
